R 回復

1. 凍結したチューブを液体窒素から取り出し、すぐに 37℃ のウォーターバスに入れ、軽く振盪します。液体が溶けたら (約 1 ～ 1.5 分)、アルコールを取り出し、非常にきれいな作業台の上に置きます。

2. 細胞懸濁液を 10ml 培地を含む 15ml 遠心分離管に移し（凍結した遠心管を培地で洗浄し、壁に付着した細胞をすべて洗浄します）、1000 で 5 分間遠心分離します。

3. 上清を反転し、培地 1ml を加えて細胞を懸濁します。 10cmディッシュに10mlの培地を入れ、軽く左右に振って細胞をディッシュ内に均一に分散させます。

4. 細胞の種類と日付、人の名前などを記入し、CO2 インキュベーターに入れ、細胞を貼り付けて培地を交換します。

5. 培地は 3 日に 1 回交換しました。

P 襲撃

1. 植物を継代して、被覆率が 80 ～ 90% に達するようにしました。

2. オリジナルメディアをアップ .

3. 適切なトリプシンを加え（細胞を覆うだけです）、1～2分間消化します。 .

4. 等量の血清含有培地を添加することにより消化を終了させた。 .

5. ピペットガンで細胞を吹き飛ばし、すべて浮遊させたままにします。

6. 細胞を15ml遠心管に吸引し、1000で5分間遠心分離した。

7. 上清を注ぎ、1 ～ 2 ml の培地を加えてすべての細胞を爆破します。

8. 細胞は、細胞種に応じていくつかの培養皿に移されました。一般に、がん細胞は5つの細胞に分かれ、3つの正常細胞が伝わります。栽培を続けます。

細胞を自由に消化し、遠心分離することができます (同上)。

適合する凍結保存溶液で細胞を懸濁し、滅菌した冷凍チューブに分割し、数分間休ませ、細胞の種類と凍結保存日を指定します。4℃ 30 分、-20℃ 30 分、-80℃ 一晩、その後、液体窒素灌流中に保存します。

凍結保存溶液の調製: 70% 培地、20% FBS、10% DMSO。 DMSO はゆっくりと加え、着実に振ってください。